Loading... 本文总结了药物生物技术的选择题和大题,仅供学习交流,严禁商用。如果您觉得有所帮助,欢迎支持我继续创作([Buy Me a Coffee☕](https://blog.mlho.net/archives/161.html#support_author))。若有发现错误或有改进建议,请通过mlh@mlho.net联系我,让我们一起提高学习效率,共同进步! ## 选择题 ### 第一次测试 1.药物生物技术以()为核心? - [X] 基因工程 - [ ] 细胞工程 - [ ] 酶工程 - [ ] 发酵工程 2.以下哪些选项是基因工程要素? - [X] 目的基因 - [X] 载体 - [X] 工具酶 - [X] 受体细胞 3.基因编辑技术包括() - [X] 同源重组 - [X] 锌指核酸酶技术 - [X] TALEN - [X] CRISPR-Cas9 4.基因编辑包括() - [X] 插入 - [X] 修改 - [X] 替换 - [ ] PCR 5.产生生物药物的来源和方法有:() - [X] 动物 - [X] 植物 - [X] 微生物 - [X] 基因工程技术 - [ ] 化学合成 6.下列不属于生物技术药物范畴的是() - [X] 三七 - [X] 人参 - [ ] 干扰素 - [ ] 白细胞介素 - [ ] 人免疫球蛋白 --- ### 第二次测试 1.DNA连接酶的作用是() - [X] 生成3'-5'磷酸二酯键 - [ ] 切除末端磷酸基,防止载体自连 - [ ] 切割DNA - [ ] 探针标记 2.以下关于PCR反应不正确的是() - [X] 复制方向从3'到5' - [ ] 需要模板 - [ ] 需要引物 - [ ] 需要DNA聚合酶 3.常用的工具酶包括() - [X] DNA连接酶 - [X] DNA聚合酶 - [X] 碱性磷酸酶 - [X] 限制酶 4.下面关于人工化学合成基因的限制正确的是() - [X] 不能合成太长的基因,只适用于克隆小分子肽的基因 - [X] 人工合成基因时,遗传密码的简并会为选择密码子带来很大困难 - [X] 费用太高 - [X] 先合成小片断基因,再合成大片段 5.目的基因的获取与制备的途径包括: - [X] 人工合成基因 - [X] 利用聚合酶链式反应-PCR技术扩增 - [X] 构建基因组文库,筛选目的基因 - [X] 构建cDNA 文库,筛选目的基因 --- ### 第三次测试 1.DNA连接酶的作用是() - [X] 生成3'-5'磷酸二酯键 - [ ] 切除末端磷酸基,防止载体自连 - [ ] 切割DNA - [ ] 探针标记 2.下列说法错误的是() - [ ] Cosmid能够自主复制 - [ ] Cosmid能被噬菌体外壳蛋白识别、组装 - [ ] 制备Cosmid可以使用质粒制备方法 - [X] Cosmid装载DNA的大小不受限制 3.质粒的空间构型包括() - [X] cccDNA - [X] ocDNA - [X] 1-DNA - [ ] 染色体 4.载体按功能分为() - [X] 克隆载体 - [X] 表达载体 - [X] 整合载体 - [ ] 连接酶 5.下面关于人工化学合成基因的限制正确的是() - [X] 不能合成太长的基因,只适用于克隆小分子肽的基因 - [X] 人工合成基因时,遗传密码的简并会为选择密码子带来很大困难 - [X] 费用太高 - [X] 先合成小片断基因,再合成大片段 6.下列属于载体的有() - [X] 质粒 - [X] 病毒 - [X] 柯斯质粒 - [X] 人工染色体 7.载体的功能包括() - [X] 运送外源基因高效转入受体细胞 - [X] 为外源基因提供复制能力或整合能力 - [X] 为外源基因的扩增或表达提供必要的条件 - [ ] 生成3'-5'磷酸二酯键 --- ### 第四次测试 1.Ca2+诱导的完整细菌细胞的转化方法适用于() - [X] 革兰阴性细菌 - [ ] 革兰阳性细菌 - [ ] 链霉菌 - [ ] 动物细胞 2.下列说法错误的是() - [ ] PCR可用于目的基因的扩增 - [ ] 质粒是常用载体 - [ ] DNA重组需要使用工具酶 - [X] 经抗性平板筛选出的重组子不需要进一步验证 3.对基因工程重组子的筛选验证方法包括() - [X] 抗性筛选 - [X] 显色反应 - [X] 分子杂交 - [X] 核酸序列分析 4.下列哪些是α-互补(lacZ’)筛选的必要条件?() - [X] 需要IPTG诱导 - [X] 宿主菌染色体上存在合成半乳糖苷酶C-端片段 - [X] 质粒上存在基因合成半乳糖苷酶的 N-端片段 - [X] 需要底物 X-gal 5.下面哪些是基因重组常用转化方法()? - [X] Ca2+诱导的完整细菌细胞的转化 - [X] 原生质体的转化 - [X] λ-噬菌体 DNA 的转染 - [X] 电穿孔转化 - [ ] 用Mgclz转化 6.DNA的体外重组包括哪些部位的连接() - [X] 粘末端连接 - [X] 平末端连接 - [X] 同聚物加尾法连接 - [X] 人工接头连接 --- ### 第五次测试 1.人用重组DNA蛋白制品总论和各种生物制品收载在:() - [ ] 药典一部 - [ ] 药典二部 - [X] 药典三部 - [ ] 药典四部 2.关于生物类似药的认识,错误的是() - [ ] 在质量方面与已获准注册的参照药具有相似性的治疗用生物制品 - [ ] 在安全性与已获准注册的参照药具有相似性的治疗用生物制品 - [ ] 在有效性方面与已获准注册的参照药具有相似性的治疗用生物制品 - [X] 在不良反应方面与已获准注册的参照药具有相似性的治疗用生物制品 3.我国上市的疫苗种类,不包括() - [X] 核酸疫苗 - [ ] 腺病毒载体疫苗 - [ ] 亚单位蛋白疫苗 - [ ] 灭活疫苗 4.产生生物药物的来源和方法有() - [X] 动物 - [X] 植物 - [X] 微生物 - [X] 基因工程技术 - [ ] 化学合成 5.下列哪些不属于生物药物范畴() - [X] 三七 - [X] 人参 - [ ] 干扰素 - [ ] 白细胞介素 - [ ] 人免疫球蛋白 --- ### 第六次测试 1.以下哪些是基因工程抗体?() - [X] 小分子抗体 - [X] 嵌合抗体 - [X] 人源化抗体 - [X] 抗体偶联药物 - [X] 抗体融合蛋白 2.根据分子结构不同可将单克隆抗体药物分为() - [X] 抗体或抗体片段 - [X] 抗体偶联物 - [ ] 人免疫球蛋白 - [X] 抗体融合蛋白 3.目前的全人源抗体库筛选技术主要包括() - [X] 噬菌体展示抗体库技术 - [X] 酵母展示技术 - [X] 核糖体展示技术 - [X] 哺乳动物细胞展示技术 - [ ] 大肠杆菌展示技术 4.第一个使用噬菌体展示技术开发的药物是() - [X] 阿达木单抗 - [ ] 曲妥珠单抗 - [ ] 纳武利尤单抗 - [ ] 帕博利单抗 5.全人源抗体及其制备方法主要包括() - [X] 高通量抗体库技术 - [X] 转基因小鼠及细胞融合技术 - [ ] NK细胞培养技术 - [X] B淋巴细胞培养技术 - [X] 单个B细胞克隆表达技术 --- ### 第七次测试 1.mRNA疫苗属于哪种类型疫苗?() - [ ] 灭活疫苗 - [ ] 减毒疫苗 - [ ] 亚单位疫苗 - [X] 基因工程疫苗 2.以下哪些是流感灭活病毒疫苗的生产流程?() - [X] 生产流感病毒株 - [X] 接种鸡胚培养 - [X] 收获病毒液 - [X] 病毒灭活 - [X] 浓缩和纯化 3.以下关于核酸疫苗说法正确的是() - [X] 由抗原的编码基因和载体组成 - [X] 可通过宿主细胞的转录系统表达蛋白抗原 - [ ] 不能诱导宿主产生细胞免疫 - [X] 能诱导宿主产生体液免疫 4.传统的疫苗包括() - [X] 减毒活疫苗 - [X] 灭活疫苗 - [X] 亚单位疫苗 - [ ] 基因工程疫苗 5.疫苗的组成包括:() - [X] 抗原 - [ ] 抗体 - [X] 佐剂 - [X] 防腐剂 - [X] 稳定剂 --- ## 问答题 ### 第2次课 **一.什么是基因工程?简述基因工程基本流程。** > **基因工程**(genetic engineering)又称DNA重组技术,就是把外源基因通过体外重组后导入受体细胞内,使这个基因能在受体细胞内复制转录,翻译表达的操作叫基因工程。 > **基本流程:**(1)目的基因的分离、获取与制备(2)目的基因与载体连接构建成为重组载体分子(3)重组DNA分子导入到受体细胞(4)外源目的基因阳性克隆的鉴定和筛选(5)外源目的基因的表达。 **二.现代生物技术制药包括哪些工程技术?列举几个常见基因工程药物** > **工程技术:** 基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程。 > **常见基因工程药物:** 重组人胰岛素、重组人干扰素α-1b、人生长激素、白细胞介素、促红细胞生成素、表皮生长因子、血小板生长因子等。 ### 第3次课 **一.什么是PCR,反应过程是什么?** > **PCR**(Polymerase Chain Reaction )法,又称为聚合酶链反应或扩增技术,是一种高效快速的体外扩增技术。 > **反应过程:** PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。 **二.常用工具酶包括那些?** > 限制性核酸内切酶、DNA连接酶、DNA聚合酶I、反转录酶、末端转移酶、碱性磷酸酶。 ### 第4次课 **一.简述限制性核酸内切酶作用。** > 能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂.形成黏性末端和平末端两种。 **二.简述DNA连接酶的作用。** > 催化在2 条 DNA 链之间形成磷酸二酯键,以共价连接平末端或粘性末端的DNA磷酸主链。 **三.简述碱性磷酸酶的作用。** > (1)防止载体自连。(2)获得5’末端磷酸基团标记的探针。 **四.PCR时需不需要使用DNA聚合酶?** > 需要。在耐热的DNA聚合酶没有发现之前,Klenow片段也曾用于PCR反应;只是每一轮扩增反应完成后,都要添加新的酶才能使反应继续,耐热DNA聚合酶(如:Taq DNA聚合酶)则很好的解决了这个问题。 ### 第5次课 **一.什么是基因工程载体?** > 在基因工程操作中,把能携带外源DNA进入受体细胞的DNA分子叫载体(vector)。在受体细胞内能够复制和/或表达(replicated and/or expressed)。 **二.常用载体分类?** > **按照来源分为**:质粒(plasmids)、病毒载体(viral vectors)、柯斯质粒(cosmids)、人工染色体(artificial chromosomes) > **按照功能分为**:(1)克隆载体:克隆一个基因或DNA片断(只用来分离和扩增插入片段)。(2)表达载体:用于一个基因编码的蛋白表达(含有启动子等转录、翻译原件)。(3)整合载体:把一个基因插入到染色体组中。 ### 第6次课 **一.什么是基因重组?** > 用类似工程设计的方法,人为转移并重新组合DNA中的基因。 **二.什么是DNA连接?** > 酶催化两个双链DNA片段相邻的5'磷酸与3’端羟基之间形成磷酸二酯键的过程。 **三.用Taq酶扩增PCR产物的特点?** > 由Taq酶扩增的PCR产物,3’末端总是带有一个非模板依赖型的突出碱基,而这个碱基几乎总是A。因为Tag酶对dATP具有优先聚合活性。 **四.什么是感受态细胞?** > 感受态(competence)就是细菌能够吸收周围环境中的 DNA 分子的生理状态。 **七.DNA重组中,为何要对转化子进行筛选和鉴定?** > 通过DNA体外重组技术,得到需要的重组 DNA 克隆是基因工程的首要目的。目的序列与载体 DNA 正确连接的效率、重组导入细胞的效率都不是百分之百的,因而最后生长繁殖出来的细胞并不都带有目的序列。 > 一般一个载体只携带某一段外源DNA,一个细胞只接受一个重组DNA 分子。最后培养出来的细胞群中只有一部分、甚至只有很小一部分是含有目的序列的重组体(recombinant),需要从大量细胞中筛选出重组质粒的转化子,所以筛选(screening)是基因克隆的重要步骤。 **八.对重组子鉴定筛选的方法包括哪些?** > **遗传学直接筛选法:** 以抗药性、显色反应、营养缺陷型、噬菌斑形成能力等为依据。此法简便快速,可以在大量群体中进行筛选。但由于目的基因插入重组分子的方向,多聚体假阳性等原因,可靠性较差。 > **分子生物学间接方法:** 以目的基因的大小、分子杂交、核苷酸序列分析、基因表达产物的放免反应等为依据。此法灵敏度高,结果可靠性强但条件要求高、难度大、费时间、筛选量有限,通常是在初筛的基础上用作最后的鉴定。 ### 20231018 **一.简述基因工程受体常见分类。** > 被导入宿主细胞分为两大类: > **第一类为原核细胞:** 枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、链霉菌等。 > **第二类为真核细胞:** 动物细胞、植物细胞、整体动物和植物、真核微生物有酵母、丝状真菌等。 **二.简述大肠杆菌作为DNA重组实验和基因工程的主要受体菌有何优势及不足?** > **优点:** (1)遗传背景清楚,载体受体系统完备;(2)培养简单,生长迅速,培养周期短,抗污染能力强;(3)重组子稳定,目的基因表达水平高。 > **不足:** (1)产生结构复杂、种类繁多的内毒素;(2)不能对重组蛋白质进行修饰加工;(3)蛋白质分泌性能不好,形成包涵(生物大分子致密地集聚在细胞内或被膜包裹或形成无膜裸露结构,这种水不溶性的结构称为包涵体);(4)蛋白质产物不能糖基化;(5)大肠杆菌细胞中含有热原物质。 **三.简述哺乳动物细胞(如中国仓鼠卵巢细胞CHO)用于基因工程的优点和不足?** > 哺乳动物细胞是DNA重组实验和基因工程的主要受体,有关人类遗传学肿瘤感染性疾病和生理学的许多研究均赖以进行。 > **优点:** (1)与人的亲缘关系近,分子重组表达系统健全;(2)具有合适的糖基化修饰系统。 > **缺点:** (1)细胞培养条件苛刻,生长缓慢;(2)适用于哺乳类动物和人的基因表达调控研究、基因药物的生产。 **四.简述大肠杆菌体系中基因表达的常用启动子有哪些?** > **大肠杆菌体系中常用的启动子:** 包括lac (乳糖启动子)、trp (色氨酸启动子)、tac (乳糖和色氨酸的杂合启动子)、lpl (l噬菌体的左向启动子)、t7噬菌体启动子等。 ### 20231025 **一.基因工程菌遗传不稳定性表现在哪些方面?** > 基因工程菌的遗传不稳定性主要表现在重组质粒的不稳定性,这种不稳定性具有下列两种表现形式: > **结构不稳定性:** 重组 DNA 分子上某一区域发生缺失、重排、修饰,导致其表观生物学功能的丧失。 > **分配不稳定性:** 整个重组 DNA 分子从受体细胞中逃逸(curing)。 **二.基因工程菌的培养方式有哪些?** > 基因工程菌的培养方式主要包括**液体培养和固体培养两种**。 **三.基因工程药物的分离纯化步骤包括哪些?** > 基因工程药物的分离纯化一般不应超过4-5个步骤,包括细胞破碎、固液分离、浓缩与初步纯化、高度纯化直至得到纯品、成品加工。 **四.基因工程目的产物分离纯化的几种常用方法包括哪些?** > 基因工程目的产物分离纯化的几种常用方法包括: > (1). **亲和纯化(Affinity Purification** :通过利用生物分子之间特有的亲和力,如酶与底物、抗体与抗原之间的特异性结合,来分离目的蛋白。 > (2). **凝胶过滤层析(Gel Filtration Chromatography** :又称为分子筛层析,通过分子大小的差异来分离蛋白质混合物。 > (3). **疏水色谱(Hydrophobic Interaction Chromatography, HIC)**与**反相色谱(Reverse-Phase Chromatography, RPC**:依据蛋白质疏水性的差异进行分离。 > (4). **离子交换色谱(Ion Exchange Chromatography**:利用蛋白质带电荷的差异,通过正负电荷相互作用的原理来分离纯化目的产物。 > (5). **层析系统**:使用特定的层析介质和适当的分离纯化条件进行纯化,可以是一种或多种层析方法的组合。 ### 20240409 **一.什么是生物技术药物?** > **生物技术药物**(biotechnological drug)是一类非常重要的生物制品,是指采用DNA重组技术和其他创新生物技术生产的用于预防、治疗和诊断疾病的药物,如细胞因子,蛋白激素,单克隆抗体,疫苗,干细胞治疗技术,治疗性重组酶,反义核酸和小干扰RNA等。 **二.简述生物技术药物的特征。** > (1) **分子量大,结构复杂:** 多为多肽、蛋白质、核酸药物,分子量多大于5000Da。(2)**稳定性差:** 受温度、pH、化学试剂、光照等因素的影响而变性失活也容易受到微生物污染或被酶解失活。(3)**选择性好、疗效确切、副作用少**。(4)**体内半衰期短:** 在体内会被酶降解,还可以被免疫系统清除。(5)**可产生免疫原性:** 如天冬酰胺酶来自于大肠杆菌,会产生较强的免疫原性,而限制其疗效。人源化单克隆抗体药物中含有少量的鼠源成分,反复使用也会产生针对药物的抗体,影响药物的疗效. ### 抗体 **1、基因工程抗体包括哪些种类?** > 包括嵌合抗体、人源化抗体、小分子抗体、抗体药物偶联物、抗体融合蛋白以及胞内抗体等。 **2、什么是全人源化抗体?** > 全人源化抗体是指将人类抗体基因通过转基因或转染色体技术,将人类编码抗体的基因全部转移至基因工程改造的抗体基因缺失动物中,使动物表达人类抗体,达到抗体全人源化的目的。 **3、什么是小分子抗体?简述其优点** > 在全抗分子的基础上,去除某些非必需的部分只保留的抗体蛋白相互作用的某些关键部分(通常是可变区)片段。包括单链抗体(single chain antibody Fragment,scfv)、Fab抗体、Fv段、单域抗体(Single Domain Antibody,sdab)等。**优点:** 具有分子量小、免疫原性低、易于清除、渗透能力强等特点。 **4、什么是抗体偶联药物?简述其优势。** > **抗体偶联药物:** 是利用抗体对靶细胞的特异性结合能力,车输送高细胞毒性化学药物,以此来实现对癌变细胞的有效杀伤的药物。 > **优势:** 抗体偶联药物能够将药物直接输送至癌细胞,最大限度地提高疗效,同时减少对正常细胞的损害,是一种精准的癌症治疗方法。 ### 疫苗 **1. 根据研制技术特点,疫苗可以分为哪几类?每类各举一例。** > (1)传统(经典)疫苗:减毒活疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗 > (2)现代疫苗:基因工程疫苗、基因疫苗、表位肽疫苗、病毒样颗粒疫苗 > (3)治疗性疫苗(非常规疫苗) **2. 列举一个你熟悉的疫苗的生产过程。** > 例:灭活全毒疫苗——流感全病毒灭活疫苗生产流程: > 流感病毒株-->接种鸡胚-->培养-->收获病毒液-->病毒灭活-->浓缩和纯化 ### PDF版获取 [点我下载](https://www.123pan.com/s/hVwgjv-zIgw3.html) 最后修改:2024 年 05 月 28 日 © 允许规范转载 打赏 赞赏作者 支付宝微信 赞 18 如果觉得我的文章对你有用,请随意赞赏